Japanese society of Ova Research

Abstract

Vol.16 No.2

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技術ノート
ウシ受精卵の性判別のための迅速FISH法
JMOR, 16(2) 77-81, 1999
DOI: 10.1274/jmor.16.77
1宮城県農業短期大学附属農場 仙台市太白区 〒982-0231 2東北大学大学院農学研究科 仙台市青葉区 〒981-8555

迅速FISH法によるウシ受精卵の性判別を紹介した。標本はウシ胚盤胞からバイオプシーした約10個の割球から作製した。PCR法により作製したDig-標識プローブ(ウシ雄特異的塩基配列BC1.2)を含むハイブリダイゼーションミックを標本に滴下し、72℃のアルミブロック上で8分間変性した。ただちに、38.5℃で5分間ハイブリダイズした後、72℃に保温したSSPEに5分間静置して高速洗浄を行った。プローブの発光は抗Dig-FITCを用いて行い、蛍光顕微鏡で観察した。FISHの操作が1時間以内に完了し、雄胚と雌胚とが明瞭に判別できることから、迅速FISH法はウシ受精卵の性判別に有効と考えられた。

Keywords: ウシ 性判別 胚盤胞 FISH 
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